Zviša se imunoreaktivni tripsin

Cistična fibroza je najbolj razširjeno prirojeno stanje, ki poslabša kakovost življenja pri belcih. Trenutno se povprečna pričakovana življenjska doba povečuje z nekaj let na 30-35 let, pričakovana življenjska doba sodobnih novorojenčkov pa do 40 let..

Cistična fibroza je avtosomno recesivna bolezen. Pri posameznikih kavkaške rase je stopnja prenosa 1:25 z rojstvom 1 bolnega otroka na 2500 rojstev. Bolezen je manj pogosta pri drugih etničnih skupinah.

Gen, ki se nahaja na kromosomu 7, kodira protein, imenovan regulator transmembraze cistične fibroze, ki ima pomanjkanje cistične fibroze. Ta protein je ciklični zaviralec kloridnih kanalov, odvisen od ATP.

Pri cistični fibrozi so ugotovili več kot 1000 različnih genskih mutacij, vendar so mutacijo AF508 našli v 75% primerov v Veliki Britaniji. Mutacija genov vpliva na resnost bolezni in življenjsko dobo. Prepoznavanje genske mutacije, ki je vključena v proces v določeni družini, omogoča prenatalno diagnozo in identifikacijo prenašalcev pri daljnih sorodnikih.

Pri cistični fibrozi okvarjen transport ion skozi epitelijske celice zunanjih žlez dihal in trebušne slinavke povzroči povečano viskoznost izločkov. Disfunkcija znojnih žlez vodi v povečano koncentracijo natrija in klorida v znoju (60-125 mmol / L - s cistično fibrozo, 10-30 mmol / L - pri zdravih otrocih).

To je osnova najpomembnejšega diagnostičnega postopka - testa znojenja, pri katerem potenje spodbuja iontoforeza pilokarpina. Znoj se zbira v posebni kapilarni cevi ali vpije na stehtani kos filtrirnega papirja. Če se ne nabere dovolj znoja, se pogosto pojavijo diagnostične napake, zato mora test opraviti izkušeno osebje. Gusta in viskozna sluz ni edina podlaga za patogenezo.

Klinične značilnosti cistične fibroze:

• Novorojenčki.
- Diagnosticirano s presejalnim pregledom novorojenčka.

• Dojenčki.
- Mekonijev ileus med novorojenčkom.
- Dolgotrajna neonatalna zlatenica.
- Motnja v razvoju.
- Ponavljajoče se okužbe dihal.
- Malabsorpcija, steatorreja.

• Mladi otroci.
- Bronhiektazija.
- Rektalni prolaps. - Polipi nosu.
- Sinusitis.

• Starejši otroci in mladostniki.
- Alergijska bronhopulmonalna aspergiloza.
- Diabetes mellitus (pogosto odvisen od insulina). - Ciroza jeter in portalna hipertenzija.
- Distalna obstrukcija črevesja.
- Pnevmotoraks ali ponavljajoča se hemoptiza. - Neplodnost pri moških.
- Naraščajoče psihološke težave.

Pri nas novorojenčke pregledajo na cistično fibrozo. Klinično je večina otrok s cistično fibrozo prisotnih z malabsorpcijo ali motnjami v razvoju ob rojstvu, ki jih spremljajo ponavljajoče se ali dolgotrajne okužbe dihal.

V pljučih (majhnih dihalnih poteh) viskozni sluzi nakazujejo na kronične okužbe, ki jih sprva povzroči Staph. aureus in H. Influenzae, nato pa Pseudomonas aeruginosa. To vodi do poškodbe bronhialne stene, nastanka bronhiektazije in abscesov. Otrok ima stalno neusahljiv produktiven kašelj z gnojnim sputumom. Fizični pregled razkrije otekanje prsnega koša zaradi mehanizma "zračne pasti", velikega inspiracijskega krepitusa in / ali piskanja.

Z dolgotrajno boleznijo otrok deformira prste v obliki "bobničk". Posledično 95% bolnikov s cistično fibrozo umre zaradi odpovedi dihanja.

Več kot 90% otrok s cistično fibrozo ima nezadostno zunanje delovanje trebušne slinavke (premalo izločanja lipaze, amilaze in proteaz), kar povzroča prebavne težave in malabsorpcijo. To vodi v motnje v razvoju, pogoste, maščobne blato (steatorreja) z bledo barvo, zelo neprijetnim vonjem in velikim volumnom. Pomanjkljivost trebušne slinavke je mogoče diagnosticirati s potrditvijo nizke elastaze blata.

Približno 10-20% otrok s cistično fibrozo je sprejetih v neonatalnem obdobju z reverzibilno črevesno obstrukcijo. Zadebeljena mekonija povzroča črevesno obstrukcijo z bruhanjem, napihnjenostjo in nezmožnostjo izločanja mekonija v prvih dneh življenja. Začetna terapija je uporaba gastrografina v klistih, vendar je operacija indicirana v večini primerov.

Ocena najstnika s cistično fibrozo

- Če so bili bratje in sestre bolni - je bolezen avtosomno recesivna
- Slani znoj v vročem vremenu lahko privede do dehidracije
- Centralni venski katetri, kot je Portachat, so nameščeni za intravenske antibiotike, medtem ko aktivno zdravijo okužbo

- Prsni koš - pomembni so naslednji simptomi:
• oteklina zaradi mehanizma "zračne pasti";
• Harrisonova brazda;
• grobi vdihavalni krepitus in / ali izdih s piskom;
• okužbe dihal

- Bobni prsti
- Brazgotina po operaciji za mekonijski ileus v novorojenčku (10-20%)

- Možne zaplete je treba spremljati:
• nosni polipi, sinusitis, rektalni prolaps;
• alergijska bronhopulmonalna aspergiloza;
• diabetes mellitus (pogosto odvisen od insulina);
• ciroza jeter in portalna hipertenzija;
• sindrom distalne obstrukcije črevesja (analog mekonijevega ileusa)
• pnevmotoraks ali ponavljajoča se hemoptiza;
• možna neplodnost pri moških

- Sputum - dokaz okužbe, akutne ali kronične, ki jo povzroča Pseudomonas ali Burkholderia cepacia

- Rast:
Normalna rast je cilj

- Prehrana:
• Gastrostomska cev za hranjenje ponoči za zagotovitev dodatnih kalorij Pomanjkanje eksokrine funkcije trebušne slinavke:
• prejema zadostno nadomestno zdravljenje z encimi trebušne slinavke;
• jemlje vitamine, topne v maščobi

- Ocena težav z dihali:
• Spirometrija - če se poslabša
• vaje za stalno dihanje?
• fizioterapija ali gimnastika?
• Ali je bronhodilatacijsko zdravljenje optimalno??
• Okužbe dihal - akutne ali kronične - in njihovo zdravljenje?
• Antibiotiki proti Pseudomonas prek nebulizatorja in DNaze?
• Če se je treba izogibati neposrednemu stiku z bolniki, ki niso družinski člani?

- Skupna ocena:
• obiskovanje šole in uspešnost;
• posebne težave zdravljenja bolezni;
• psihološke potrebe

Pregled novorojenčkov za cistično fibrozo

Pregled novorojenčkov za cistično fibrozo izboljša delovanje pljuč v otroštvu, zmanjša podhranjenost in izboljša nevropsihični razvoj. Povsod pri nas potekajo rutinski pregledi vseh novorojenčkov za cistično fibrozo. Bolniki s cistično fibrozo imajo povečano raven imunoreaktivnega tripsina, kar se lahko meri s standardnim vzorcem pete, odvzetim za biokemični pregled vseh dojenčkov (Guthriejev test). Nato vzorce s povečano stopnjo imunoreaktivnega tripsina testirajo na skupne genske mutacije pri cistični fibrozi, otrokom z dvema mutacijama pa se preskus znojnic potrdi. Vzpostavitev diagnoze v novorojenčku omogoča zgodnje začetek rednega zdravljenja. To omogoča tudi zgodnje genetsko svetovanje staršev in jih seznanimo s tveganjem ponovnega rojstva takega otroka 1: 4 in možnostjo prenatalne diagnoze v naslednji nosečnosti..

Pri vsakem otroku s ponavljajočimi se okužbami, ohlapnim blatu ali motnjami v razvoju je treba izključiti diagnozo cistične fibroze..

Neonatalni presejalni pregledi

Diagnozo cistične fibroze danes olajšujejo presejalni testi novorojenčkov, ki se izvajajo v večini regij Italije. Beseda "presejanje" (iz angleščine - "glavnik") pomeni pregled vseh zdravih ljudi, da bi ugotovili nekatere skrite in pomembne bolezni. Namen neonatalnega presejanja je prepoznati nekatere bolezni, ki jih lahko, če jih odkrijemo zgodaj, zdravimo z odličnimi rezultati. To so bolezni, ki so prisotne že od rojstva, vendar se morda ne pojavijo v prvih mesecih življenja, to so bolezni, kot so fenilketonurija, prirojena hipotiroidizem in cistična fibroza. Če pri fenilketonuriji (1 primer na 20.000 novorojenčkov) in prirojeni hipotiroidizmu (1 od 2.500) zgodnje odkrivanje omogoča zgodnje zdravljenje in vodi v ozdravitev, potem pri cistični fibrozi presejanje omogoča zgodnje in pravočasno zdravljenje, ki, čeprav ne vodi v ozdravitev, oz. vendar pa lahko podaljša življenje in izboljša njegovo kakovost. Pregledi pri novorojenčkih temeljijo na določitvi ravni določenega beljakovine v krvi, encima trebušne slinavke - tripsina (test na imunoreaktivni tripsin ali IRT). Raven tripsina se določi v kapljici krvi, odvzete s pete, na blot papirju 3.-4. Dan po rojstvu. Če raven RTI presega določen normalen prag (to je določen indikator za vsak presejalni laboratorij), potem sumimo na prisotnost bolezni. V tem primeru se v večini laboratorijev genetski test opravi na drugi posušeni kapljici krvi, preden moti otrokovo družino. Če z genetsko analizo ugotovimo prisotnost dveh mutacij v genu CFTR, potem diagnoza cistične fibroze ni nesporna. V drugih centrih, če je rezultat testa 10 pozitiven za IRT, starše z otrokom pokličejo na ponovno analizo na IRT (običajno pri 20-30 dneh življenja): če je rezultat normalen, potem je vprašanje zaprto, če je spet pozitiven, potem se opravi test znojenja in nato, morda, genetske raziskave. Običajno je za postavitev diagnoze kritičen znojni test, tudi če sta bili predhodno ugotovljeni dve mutaciji CFTR. Če test znoja kaže na prisotnost cistične fibroze, se običajno pripravi kratka hospitalizacija otroka, da se ugotovi značilnosti bolezni (stopnja vključenosti v pljučni proces, prisotnost ali odsotnost insuficience trebušne slinavke itd.) In predpiše program zdravljenja.

Kaj pomeni pozitiven rezultat presejanja??

Pozitiven presejalni rezultat kaže na sum cistične fibroze. Ta sum lahko s poznejšimi raziskavami potrdimo ("resnično pozitiven") ali ovržemo ("lažno pozitiven"). Dejansko neonatalni presek za cistično fibrozo daje določeno število pozitivnih rezultatov pri popolnoma zdravih otrocih: od vsakih 3-6 primerov pozitivnega rezultata se le eden izkaže, da je resnično bolan s cistično fibrozo, ostali pa so lažno pozitivni rezultati. To je zato, ker povišana raven tripsina v krvi ni ozko specifičen označevalec cistične fibroze in se lahko poveča le s cistično fibrozo ali povišano ob rojstvu, če je otrok zdrav, se normalizira v naslednjih dneh ali tednih. Nasprotno, pri bolniku s cistično fibrozo ostane povišana dolgo, mesece. Zato so potrebne poglobljene raziskave, ki so bile zgoraj omenjene. Ena izmed njih so genetske raziskave. Zazna lahko prisotnost mutacij v genu CFTR, ne da bi določil njihovo število - eno ali dve. Če pa je samo ena mutacija, je lahko otrok le zdrav nosilec, če pa sta v CFTR genu dve mutaciji, bo otrok nedvomno bolan, za potrditev končne diagnoze pa je potreben test znoja. Zato je tako pomembno, da čim prej opravite test znoja, da zagotovite gotovost, pomirite starše in po potrebi začnete z ustreznim zdravljenjem..

Kaj pomeni negativni rezultat presejanja??

Negativni presejalni rezultati kažejo, da test tripsina ni povzročil suma na cistično fibrozo. To skoraj vedno kaže na odsotnost cistične fibroze ("resnični negativni" rezultat). Otroci z "resnično negativno" predstavljajo večino primerov. Vendar pa so med presejanjem redki "lažno negativni" rezultati. Ni mogoče zagotovo reči, toda pri 3-5% bolnih otrok med presejanjem ne prepoznamo. To so otroci s cistično fibrozo, pri katerih test na tripsin ni pokazal prisotnosti bolezni, vendar se diagnoza postavi v naslednjih letih življenja, in sicer na podlagi manifestacij, ki človeku omogočajo sum na prisotnost bolezni. Če je rezultat presejanja negativen, je zelo malo verjetno, da ima otrok cistično fibrozo, vendar je v teoriji še vedno majhna možnost za to in če obstajajo sumljivi znaki, je vedno bolje narediti test znoj..

Kaj so genetske raziskave?

Sestavljen je v tem, da se odvzame majhna količina krvi (zadostuje kapljica krvi, odvzeta med neonatalnim pregledom). DNK se izloči iz krvi in ​​opravi se njegova genetska analiza (= iskanje mutacij v CFTR genu). Preizkus se opravi za potrditev diagnoze cistične fibroze: diagnoza se potrdi, ko prepoznamo dve mutaciji CFTR (lahko sta enaki ali dve različni). Ker ta test ne more zaznati vseh mutacij v genu CFTR, se zgodi, da je zaznana samo ena mutacija. V teh primerih je rezultat preskusa znoja odločilen za diagnozo cistične fibroze. Določitev mutacije gena CFTR ne omogoča določitve prognoze poteka bolezni pri otroku. Nepogrešljivo pa je, če želijo otrokovi starši med nadaljnjo nosečnostjo opraviti prenatalno diagnostiko. Potrebno je tudi za natančno prepoznavanje zdravih nosilcev mutacije med bolnikovimi neposrednimi sorodniki..

Pregled na cistično fibrozo

Čas branja: min.

Preiskava cistične fibroze v bolnišnici je namenjena prepoznavanju bolezni, še preden se pojavijo klinični znaki. Njegova glavna naloga je zgodnje odkrivanje bolnih otrok in pravočasno imenovanje ustrezne terapije..

Ime storitveCena
Zaloga! Začetno posvetovanje z reproduktologom in ultrazvokom0 rub.
Začetno posvetovanje z reproduktologom, dr. Osina E.A..10.000 RUB.
Posvetovanje z genetiki prek Skypea ali telefona2 500 rubljev.
Večkratno posvetovanje genetika2 500 rubljev.
Začetno posvetovanje z genetikom (Posvetovanje z genetikom - ugotavljanje tveganja za rojstvo otroka z dednimi boleznimi)3.500 rubljev.
Posvetovanje z genetiki pred PGD3 300 rub.
Vistara test (Natera)78.000 RUB.
Vistara test v povezavi s Panorama Basic (Natera)95 550 rbl.
Vistara test v povezavi s podaljšano panoramo (Natera)107 250 rub.
Neinvazivni prenatalni pregled ploda na aneuplodijo (PANORAMA)33 900 rub.
Neinvazivni prenatalni pregled ploda na aneuploidije + plošča mikrodelementov (PANORAMA)47 500 rub.
Citogenetska študija splavnega materiala (24 kromosomi, aGGH)15.000 rubljev.
Citogenetska analiza splava ANORA (Natera)53.200 RUB.
Prenatalni kompleks 10-13 tednov (brezplačna b-podenota človekovega korionskega gonadotropina (prosti b-hCG, prosti b-hCG)2 100 rubljev.
Prenatalni kompleks 14-20 tednov (Človeški korionski gonadotropin (hCG, beta-hCG, b-hCG, človeški korionski gonadotropin, HCG)2 400 rub.
Plošča Horizon 4 (Natera)27 300 rub.
Horizon Panel 27 (Natera)31.200 RUB.
Plošča Horizon 106 (Natera)42 900 rub.
Plošča Horizon 274 (Natera)50 700 rub.
Predhodna faza PGT za nosilce monogenskih mutacij (kri z EDTA)112.500 rubljev.
Monogene bolezni PGT (do 8 zarodkov)187.000 rubljev.
PGT za 24 kromosomov med PGT monogene bolezni (1 zarodek)20.000 rubljev.
Predimplantacijsko genetsko testiranje za 24 kromosomov (1 zarodek), brez genskega posvetovanja na podlagi rezultatov PGT23.000 rubljev.
Hitro genetsko diagnozo predimplantacijske diagnoze za 24 kromosomov (1 zarodek)48.000 RUB.
Predimplantacijsko genetsko testiranje na 24 kromosomov - za vsak dodatni zarodek, začenši s tretjim20.000 rubljev.
Predimplantacijsko genetsko testiranje 24 kromosomov + translokacija (do 2 zarodka)72.000 rubljev.
Predimplantacijsko genetsko testiranje 24 kromosomov + translokacija (za vsakega dodatnega zarodka, začenši s 3)35.000 rubljev.
Predimplantacijsko genetsko testiranje omamljenih zarodkov60.000 RUB.
Priprava zarodkov za ponavljajoče genetsko testiranje10 780 rub.

Ta metoda temelji na določitvi ravni imunoreaktivnega tripsina (IRT) v suhi točki kapilarne krvi novorojenčkov. Za razliko od prenatalnega presejanja se opravi po rojstvu otroka. Trenutno je pregled novorojenčkov obvezen postopek za novorojenčke. Pregled na cistično fibrozo je mogoče potrditi v različnih fazah te diagnoze. Prva stopnja je odvzem krvi iz pete (na posebnem filtrirnem papirju) novorojenčka v 4-7 dneh življenja. Nato se v posušeni krvni pečici na posebnem preskusnem vzorcu izračuna vsebnost imunoreaktivnega tripsina. Za normalno odčitavanje lahko štejemo 65-70ng / l. Če so ti kazalniki preseženi 5 ali celo 10-krat, lahko govorimo o prehodu na drugo stopnjo diagnostike bolezni cistična fibroza. Neonatalni presek druge stopnje se izvaja 21. in 28. dan otrokovega življenja. Ta faza je ponovitev prvega. Od otroka se odvzame tudi vzorec krvi za določitev imunoreaktivnega tripsina. Običajno odčitki v tem življenjskem obdobju ne smejo presegati 40ng / l. Če je pregled na cistično fibrozo pozitiven, je potrebna tretja stopnja. Na tej stopnji je potrebno opraviti test znoj in genetske teste. Ker med temi testi lahko pride do lažno pozitivnih rezultatov. Tretja stopnja bo zdravnikom omogočila, da potrdijo ali zanikajo možnost postavitve te diagnoze. Lažni znaki se lahko pojavijo v naslednjih pogojih:

  • drugi presejalni pregled je bil poznejši od datuma zapadlosti (21–28 dni življenja);
  • s fetalno hipoksijo;
  • z intrauterinimi okužbami;
  • indikator ni vedno informativen za mekonijev ileus;
  • raven imunoreaktivnega tripsina se poveča in z odpovedjo ledvic črevesno atrezijo.

Prvi simptomi cistične fibroze se pojavijo 6 mesecev po rojstvu, ko dojenček preide na umetno hranjenje (hranila in zaščitne snovi, ki jih vsebuje materino mleko, začasno ustavijo razvoj bolezni). Poraz trebušne slinavke vodi v pomanjkanje prebavnih encimov, zaradi česar se hrana ne prebavi, gnojni procesi pa prevladujejo v črevesju. Motena absorpcija hranil vodi do hipovitaminoze, zaostajanja v telesnem razvoju, distrofičnih sprememb v različnih organih itd..

Običajni odčitki so vzorčne številke največ 40 mmol / l. S povečanjem rezultata za vzorce za cistično fibrozo presejanje preide na četrto stopnjo. Izvaja se s povečanjem rezultata testa z znojem z 40 na 60 mmol / l. V tem primeru je dodeljena diagnostika DNA za 10-20 mutacij, ki so pogoste v neposrednem območju. Če je rezultat preskusa znoj nedvoumno pozitiven, kjer vrednosti presegajo 60 mmol / l, se diagnoza potrdi. Otrok je prijavljen v najbližjem centru za cistično fibrozo.

Če se bolezen ne potrdi, takšnega otroka opazujemo eno leto, nato pa se izvajajo ponovljeni testi znoja in predpiše analiza zalege za elastazo-1..

Izvedena je tudi prenatalna diagnoza cistične fibroze, ki temelji na genetskem svetovanju in pregledu staršev ter na genetski študiji celic, pridobljenih z amniocentezo.

Različne metode pregleda funkcije trebušne slinavke

Serumski imunoreaktivni tripsin, inhibitorji tripsina, tripsin

Velikega pomena pri diagnozi pankreatitisa je določanje aktivnosti tripsina v krvnem serumu, ki ga proizvajajo samo akinarne celice trebušne slinavke. Tako je ta encim specifičen za trebušno slinavko.

Vsebnost imunoreaktivnega tripsina v krvnem serumu je mogoče natančno izmeriti z radioimunološkim testom. To metodo podrobno opisuje T.P. Les, vendar je njegova klinična uporaba omejena, saj so nakopičene izkušnje pokazale, da merjenje aktivnosti tripsina v serumu ni dovolj občutljivo za njegovo uspešno uporabo kot diagnostični test pri CP. Obstajajo dokazi, da se lahko v številnih primerih z OP in poslabšanjem CP aktivnost encima v krvi poveča za 20-70 krat.

Nizka zanesljivost študije je posledica vezave aktivnega tripsina na inhibitorje - a1-antitripsin in a2-makroglobulin. Hkrati protitelesa, ki jih vsebujejo ustrezni diagnostični seti, slabo "prepoznajo" tripsin v kombinaciji z zaviralci. To pojasnjuje dejstvo, da je specifičnost testa nad 95%, občutljivost pa le 40%. V klinični praksi je pogostost lažno negativnih rezultatov precej visoka, zato ta test velja za nezadovoljiv..

Povišanje ravni imunoreaktivnega tripsina najdemo pri kronični odpovedi ledvic, hiperkorgikciji, raku trebušne slinavke, kalkuličnem holecistitisu. Nizki indeksi aktivnosti imunoreaktivnega tripsina so značilni za zunanjo insuficienco trebušne slinavke. Monotona krivulja dinamike aktivnosti encimov po obremenitvi s hrano je še posebej značilna v eksperimentalnih in kliničnih študijah..

Številni avtorji predlagajo uporabo določitve aktivnosti imunoreaktivnega tripsina v krvi kot presejalni test za diagnozo eksokrine insuficience trebušne slinavke pri bolnikih z dolgotrajnim CP z izidom fibroze organov. Vendar pa lahko pri raku trebušne slinavke zabeležimo znižanje kazalca. Da bi zmanjšali pogostost pred negativnih rezultatov raziskav na CP, je bilo predlagano določiti aktivnost encima in njegovih zaviralcev po stimulaciji s cerulsinom, pankreosiminom ali s hrano.

Določanje vsebnosti zaviralcev tripsina v krvnem serumu se uporablja tudi za diagnosticiranje pankreatitisa, vendar so njihovi kazalniki večsmerni in jasna razlaga rezultatov ni vedno mogoča. Povečanje ravni zaviralcev tripsina v krvi pogosto kaže na mobilizacijo zaviralnega sistema v plazmi, kar povzroča psevdo-normalne parametre tripsinemije. Nasprotno pa nizka vsebnost zaviralcev plazme ponavadi kaže na njihovo aktivno uživanje, zmanjšanje zmogljivosti ali izčrpavanje obrambnih mehanizmov med hudim uničenjem trebušne slinavke. Hkrati kakršna koli razmerja zaviralca proteaze v serumu ne odražajo razmerja v tkivu trebušne slinavke, zato zdravnika ne more obvestiti o obliki, resnosti in ponekod o potrditvi diagnoze pankreatitisa.

Tripsinogen, ki kroži v krvi, je polarnost razdeljen na kagionsko in anionsko. Normalno razmerje teh oblik v serumu je 2: 1. S pankreatitisom pride do izrazitejšega povišanja krvi anionske oblike tripsinogena.

V zadnjih letih so bili objavljeni podatki o zadostni informativni vsebini za določanje vsebnosti tripsinagena v urinu. Občutljivost in specifičnost določanja ravni tripsinagen-2 v urinu pri diferencialni diagnozi OP in akutne trebušne patologije nepankreasnega izvora doseže 91-95% oziroma 95-99%.

Serumska lipaza in fosfolipaza

Hiperlipasemija ne velja za strogo specifično za patologijo trebušne slinavke, saj se pojavlja pri drugih boleznih prebavil. Kljub temu je povečanje aktivnosti lipaze v krvi dvakrat bolj specifično za pankreatitis kot hiperamilamemija. Dejansko hiperlipasemije ne zaznamo pri apendicitisu, zunajmaternični nosečnosti, parotitisu, pljučnem raku, vendar jo zabeležimo pri 60% bolnikov z boleznimi hepatobiliarnega sistema, s črevesno obstrukcijo, ledvično odpovedjo, rakom prostate in drugimi boleznimi trebušne slinavke. Nemogoče je določiti resnost trenutnega poslabšanja pankreatitisa in takojšnjo prognozo z aktivnostjo serumske lipaze. Natančneje, zmanjšanje aktivnosti encima v krvi s fibrozo trebušne slinavke, ki je posledica CP in cistične fibroze.

V zadnjih letih je bil velik pomen pri diagnozi pankreatitisa, pri določanju prognoze in verjetnosti zapletov pripisan preučevanju aktivnosti fosfolipaze A2 v krvi in ​​urinu. To je posledica dejstva, da ima ključno vlogo v patogenezi pankreatitisa zaradi tropizma za lipidi celičnih membran in sposobnosti, da povzročijo njihovo škodo. Poleg tega fosfolipaza A2, odstranjevanje maščobne kisline iz lecitina, spodbuja nastanek lizolecitina, ki ob vstopu v GLP v nekaj minutah povzroči edeme, po nekaj urah pa - nekrozo parenhima trebušne slinavke. Zato povečanje aktivnosti fosfolipaze v krvi velja za idealnega označevalca destruktivnih procesov..

Rezultati številnih raziskav kažejo na visoko občutljivost (do 100%) in specifičnost (do 90%) pri določanju aktivnosti fosfolipaze A2 tipa I v krvi pri pankreatitisu, saj velja za encim, ki je specifičen za trebušno slinavko. Dokazano je, da se povečanje njegove aktivnosti v krvi zgodi prej in traja dlje kot povečanje aktivnosti skupne amilaze, izoamilaze trebušne slinavke, imunoreaktivnega tripsina in lipaze, raven hiperfosfo-lipasemije pa korelira z resnostjo poslabšanja CP.

Razvite so bile bolj občutljive - imunofluorometrične in radioimunološke metode za preučevanje aktivnosti encimov. Omogočajo določitev ne le celotne frakcije fosfolipaze A2, temveč tudi aktivnosti proencima in aktivnega encima. Z poslabšanjem CP se razmerje med njimi močno spremeni proti povečanju aktivnosti fosfolipaze.

Določitev aktivnosti fusfolipaze A2 prve vrste v krvi velja za občutljivo glede na eksokrino insuficienco trebušne slinavke, saj stopnja zmanjšanja aktivnosti encima v krvi korelira s parametri tajin-pankreozmininskega testa.

Serumska elastaza-1

Obstajajo tri vrste elastaz: trebušna slinavka prve in druge vrste in nevtrofilna elastaza. Čeprav imajo ti encimi podobne kemijske lastnosti, se bistveno imunološko razlikujejo, kar omogoča njihovo ločeno določitev. Trenutno se uporablja encimsko povezan imunosuorbentni test za določanje humane elastaze prve vrste (EL1SA - encimsko-imunosorbentni test). Na ta način je mogoče določiti aktivnost prve vrste elastaze v kateri koli biološki tekočini, trenutno pa se za preučevanje encimske aktivnosti proizvaja samo sklop reagentov, ki omogočajo oceno pojava utajevanja encimov v OP.

Aktivnost tega encima v krvi se pri pankreatitisu poveča prej kot aktivnost drugih encimov in se zadrži dlje. Določitev aktivnosti elastaze prve vrste velja za najbolj "pozno" občutljiv test za diagnosticiranje poslabšanj CP, saj povišana raven v krvi vztraja 8-10 dni po napadu. V tem obdobju se aktivnost elastaze tipa I v krvi poveča pri 100% bolnikov, raven lipaze - v 85%, imunoreaktivni tripsin - v 58%, pankreasna izoamilaza - v 43%, skupna os-amilaza - pri 23% bolnikov.

Podatki o posebnosti hiperelastasemije so nasprotujoči si. Obstaja mnenje, da aktivnost encima ne ustreza stopnji uničenja tkiva trebušne slinavke in nima velike diagnostične vrednosti pri funkcionalni insuficienci pri bolnikih z dolgotrajno CP..

Redko odkriti encimi pankreasa

Redkeje se uporabljajo določitev aktivnosti drugih encimov v krvi: carboxypeptidases A in B, dehidrogenaze, nukleaze, glutation transferaza, hialuronat endoglucoaminidase, glipinamide, inotransferase, holesterol esteraza, katepsinov B, D in L, itd Vendar pa so metode za preučevanje svojo dejavnost v bioloških tekočinah težko in zapleteno. Vsebnost diagnostičnih informacij teh testov ne opravičuje vedno zahtevnosti in stroškov njihove izvedbe. Določanje vsebnosti beljakovin, povezanih s pankreatitisom, v krvi in ​​urinu velja za obetavno. Tabela 2-9 povzemamo podatke o občutljivosti in specifičnosti določanja aktivnosti številnih encimov trebušne slinavke na podlagi rezultatov raziskav najbolj avtoritativnih centrov in avtorjev..

Tabela 2-9. Diagnostična vrednost določitve različnih markerjev pri diagnozi akutnega pankreatitisa

Št. AN25TLI, imunoreaktivnost, podobna tripsinu, TLI

Obdobje izvršitve

3 delovne dni (plus 1-2 dni za regije)

Študijsko gradivo

Metoda določanja

Študija imunoreaktivnosti tripsin podobne imunoreaktivnosti (TLI) krvnega seruma je metoda za vrsto specifično diagnozo eksocrine insuficience trebušne slinavke (ENPI), ki se izvaja z uporabo encimske imunoanalize.

Študija uporablja protitelesa, značilna za vrsto, ki jih najdemo v krvnem serumu, pa tudi kationski tripsin in tripsin (zimogen ali neaktivni tripsin zimogen), ki sta povezana z zaviralcem proteinaze.

Trippsinogen se sintetizira in skladišči v akinarskih celicah trebušne slinavke, v fizioloških pogojih pa se v majhni količini sprosti v žilno posteljo. Trippsinogen se pretvori v tripsin v tankem črevesu in je aktivna oblika proteolitičnega encima. Trippsinogen in tripsin se ne absorbira iz črevesja. Tako serumski TLI odraža dejansko sproščanje tripsinagena neposredno iz trebušne slinavke. Trippsin in tripsingen sta si zelo podobna, test TLI lahko zazna oba encima v serumu. Analiza razkrije tudi del tripsina, ki je reverzibilno povezan z α inhibitorjem. Vse to pojasnjuje ime te študije..

Sindrom EPI se razvije kot posledica zmanjšanja števila akinarskih celic trebušne slinavke, kar se pogosto pojavi z akinarsko atrofijo trebušne slinavke (dedna nagnjenost pri nemških ovčarjih) ali kroničnim pankreatitisom. Zmanjšanje akinarskih celic vodi do zmanjšanja sinteze in sproščanja tripsinagena v črevesje in v kri ter do zmanjšanja serumskega TLI. Klinični znaki EPI se običajno ne razvijejo, dokler se funkcionalna zmogljivost trebušne slinavke ne zmanjša na 10-15% normalne vrednosti.

TLI test je koristen pri razlikovanju maldigestizacije od primarne malabsorpcije in bi moral biti del rutinske študije pri pasji driski tankega črevesa. EPI je treba izključiti, preden razmislimo o diagnozi primarne črevesne bolezni. V večini primerov je TLI izrazito zmanjšan pri EPI v primerjavi z zdravimi psi ali psi s črevesno malabsorpcijo..
Študijo TLI, prvotno predlagano za diagnozo EPI pri psih, lahko uporabimo kot dodaten test za sum pankreatitisa (če ni ledvične bolezni). Običajno se pri pankreatitisu odkrijejo visoke vrednosti TLI. Vendar pa ta študija pri diagnozi pankreatitisa ni tako informativna kot določitev pankreasne lipaze pri psih. Specifičnost je bila ugotovljena pri 65%, občutljivost pa le 33%. Občutljivost metode je verjetno zmanjšana zaradi kratkega razpolovnega časa preučenih encimov. Vrednost TLI se lahko vrne v normalno stanje v nekaj urah po nastanku pankreatitisa. Najvišja vrednost TLI je določena, ko se pojavijo klinični znaki pankreatitisa. Pri kroničnem pankreatitisu koncentracija encima v serumu morda ne bo zadoščala za odkrivanje. Nekateri psi s pankreatitisom imajo lahko povišano TLI z normalno ravenjo lipaze trebušne slinavke, običajni TLI pa ne izključuje pankreatitisa, kar kaže na to, da sta potrebna oba..

Da bi dobili bolj natančne rezultate, naj bi bile živali na testiranju zaradi stradanja vsaj 12 ur pred testiranjem..
Vzorec je stabilen 1 teden pri temperaturi skladiščenja + 2 ° C... + 8 ° C; ob zamrzovanju -17C... -23C ostane stabilen 2 meseca.

Rezultati študije vsebujejo informacije izključno za zdravnike. Diagnoza se postavi na podlagi celovite ocene različnih kazalcev, dodatnih informacij in je odvisna od diagnostičnih metod.

VET UNION laboratorijske enote: ng / ml.

Pregled za cistično fibrozo: prepoznavanje nevarne monogenske patologije, ki je asimptomatska

Pregled na cistično fibrozo (cistična fibroza) je edini način, da se naučimo o nenormalnem razvoju beljakovin, ki so odgovorne za pravilen transport klorovih ionov do organov, ki proizvajajo različne izločke: znoj, sluz, slina, prebavni sokovi in ​​tekočine, potrebne za spočetje potomcev tudi v fazi asimptomatskega poteka ta avtosomno recesivna dedna bolezen.

Kljub temu, da je ta bolezen povezana z resno disfunkcijo najpomembnejših telesnih sistemov, kot so trebušna slinavka, črevesje, bronhi in pljuča, jetra, izločki in genitalije, mnoge mutacije genov CFTR povzročajo različne simptomatske oblike, ki se ne kažejo nujno pri otrocih in mladostništvo. Torej, če ima bolnik blago obliko genetske patologije, so lahko značilni znaki bodisi ne izraziti in podobni drugim boleznim, bodisi odsotni.

Poleg tega je treba to metodo pregleda posvetiti ljudem z obremenjeno dednostjo, ki so imeli sorodnike v družini, ki so imeli kronična obolenja, ki so jim diagnosticirali bronhialno astmo, črevesno obstrukcijo, neplodnost, pankreatitis in cirozo jeter, pa tudi tiste, ki do 40 let niso živeli. Kot kaže praksa, bolniki z monogeno CFTR patologijo ne živijo do 35-40 let. Opravljanje analiz in posebnih testov je za takšne ljudi pomembno, saj so lahko nosilci neugodnega mutacijskega gena, kar povečuje tveganje za prenos tega na prihodnje generacije..

Obvezen program cistične fibroze

Danes je presejalni pregled za cistično fibrozo v porodnišnici obvezen postopek, ki je del nabora zveznih ukrepov za boj proti genetskim patologijam. In novopečeni starši zagotovo poznajo test IRT / DNK, ko odvzamejo kapljico krvi iz pete dojenčka, ki se posuši, nato pa zdravniki določijo raven encimov imunoreaktivnega tripsina po njem.

Če je prva faza pregleda, ki se običajno opravi na 4-5. dan dojenčkovega bivanja v porodnišnici, pokazala negativen rezultat, to je, da število IRT ne presega norme 65-70 ng / ml, se šteje, da je otrok pogojno zdrav.

Pregledi na cistično fibrozo pri novorojenčkih, pri katerih je encim trebušne slinavke 5-10-krat višji od norme, preidejo na drugo stopnjo, ki se izvaja strogo od 21 do 28 dni življenja majhnega pacienta. V tej fazi se opravi ponavljajoče odvzem krvi in ​​testiranje količinske vsebnosti IRT. Normativni kazalnik za zdrave otroke tega življenjskega obdobja ne presega 40 ng / mg. Če po tem analize vašega otroka potrdijo aktivnost imunoreaktivnega tripsina, zdravniki pošljejo starše z otrokom, da odvzamejo vzorce znoja. To je potrebno za potrditev ali izključitev monogenske mutacije, saj je lahko zvišanje ravni IRT pri dojenčkih posledica različnih patologij, vključno z:

  • fetalna hipoksija;
  • intrauterine okužbe;
  • konjugacijska zlatenica;
  • perinatalni stres;
  • kromosomske preureditve.

Do danes so samo vzorci znoja najbolj natančen način za diagnosticiranje cistične fibroze pri dojenčkih in otrocih, mlajših od 2 let. Poleg tega jih je treba izvesti vsaj 2-3 krat, saj se kazalniki v različnih obdobjih testiranja lahko razlikujejo.

Razlike med neonatalno in prenatalno diagnozo

Ti dve metodi odkrivanja mutacijskega gena se bistveno razlikujeta med seboj, saj lahko prenatalni pregled bolezni razkrije bolezen že v fazi razvoja ploda, neonatalni presek za cistično fibrozo pa vključuje odkrivanje potencialne nevarnosti, ko se otrok rodi v prvih mesecih svojega življenja..

Poleg tega takšne diagnostične metode delujejo z različnimi vrstami analiz. Za prenatalno diagnozo se pregledajo slina in kri staršev, ter horionska biopsija in amniopunktura.

Med izvajanjem NS za cistično fibrozo se strokovnjaki iz različnih laboratorijev in medicinskih centrov osredotočajo na različne raziskovalne taktike. Na primer, v Evropi in ZDA se analiza primerov v zvezi z veliko mešanico velikega števila narodnosti šteje za neučinkovito. Zato uporabljajo alternativno metodo - odkrivanje beljakovin pankreatina (PAP), ki jih je mogoče izolirati ali kombinirati s povečano stopnjo pankreasnega encima. Na podlagi te tehnike so zdravniki razvili poseben komplet za oceno PAP + IRT, ki ga uspešno uporabljajo zdravniki vodilnih ruskih klinik..

Mnogi starši si zastavijo vprašanje: "Kaj pa če je NS potrdil prisotnost cistične fibroze?" Izkušeni strokovnjaki priporočajo, da se nemudoma obrnete na zdravnika ozkega profila z bogatimi izkušnjami pri zdravljenju monogenskih mutacij. To bo skrajšalo obdobje psihološke prilagoditve novopečenih staršev na stanje njihovega dojenčka in nudilo strokovno pomoč v kratkem času. Če dojenček ne poslabša patologije, je dovolj, da starši v prvih treh mesecih otrokovega življenja vsaka dva tedna obiščejo zdravnika. Od leta naprej bodo obiski pri specialistu redkejši - enkrat na četrtletje. Najpomembneje je, da v obdobju do dveh let, ko je tveganje poslabšanja simptomov največje, skrbno spremljajte zdravje svojega otroka in se držite učinkovite strategije zdravljenja, ki jo predpiše pediater.

Kaj je tripsin v analizi krvi in ​​blata?

Trippsin je proteolitični encim (encim), ki ga izloča zunanji del trebušne slinavke. Prvič, njegov predhodnik nastaja v neaktivnem stanju - tripsin.

Vstopi v dvanajstnik in tam se aktivira zaradi delovanja drugega encima na njem - enterokinaze.

Tripsin je po kemijski zgradbi razvrščen kot protein. V praksi se pridobiva iz goveda..

Funkcije tripsina

Najpomembnejša funkcija tripsina je proteoliza, tj. cepljenje beljakovin in polipeptidov na manjše komponente - aminokisline. Je katalitični encim.

Z drugimi besedami, razgradi beljakovine s tripsinom. Znani so tudi drugi encimi trebušne slinavke - lipaza, ki sodeluje pri prebavi maščob, in alfa-amilaza, ki razgrajuje ogljikove hidrate. Amilaza ni samo encim trebušne slinavke, sintetizira se tudi v slinavkah, vendar v majhnih količinah.

Trippsin, amilaza in lipaza so najpomembnejše snovi v prebavnem traktu. Če vsaj enega od njih ni, je prebava hrane močno oslabljena..

Poleg tega, da sodeluje pri prebavi, je encim tripsin zelo učinkovit pri zdravljenju različnih bolezni:

  • pomaga zmanjšati vnetje v telesu;
  • pospešuje celjenje opeklin, hudih ran;
  • sposobni razgraditi odmrlo tkivo, tako da produkti nekroze ne vstopijo v krvni obtok in povzročijo zastrupitve;
  • naredi goste izločke, praznjenje bolj tekoče;
  • olajša utekočinjenje krvnih strdkov;
  • pomaga pri zdravljenju bolezni s fibrinoznim vnetjem;
  • izboljša odstranjevanje gnojnih mas;
  • zdravi hude ulcerativne okvare ustne votline;

V neaktivnem stanju je ta povezava popolnoma varna.

Indikacije in kontraindikacije

Ker ima tripsin tako izrazite zdravilne lastnosti, se uporablja za izdelavo zdravil.

Kot vsaka druga učinkovina katerega koli zdravila ima tudi uporaba tripsina lastne indikacije in kontraindikacije za uporabo..

Pri uporabi zdravil, ki vključujejo tripsin, morate strogo upoštevati zdravnikova priporočila in navodila za uporabo zdravila.

  1. Amorfna - nanese se lahko le topično (na omejenem območju kože).
  2. Kristalni - proizvaja se v obliki belo-rumenega prahu, brez značilnega vonja. Uporablja se lokalno in za intramuskularno aplikacijo.

Trippsin se proizvaja pod različnimi imeni: Pax-Trypsin, Terridekase, Ribonuclease, Asperaza, Lizoamidase, Dalcex, Profesim, Irukson. Vsa zdravila je treba hraniti na suhem, temnem mestu pri temperaturi, ki ne presega deset stopinj.

Indikacije za uporabo so:

  • vnetne bolezni pljuč in dihalnih poti (bronhitis, pljučnica, eksudativna plevritis);
  • bronhiektazije (prisotnost akutnih širitev v bronhijih);
  • okužene opekline in rane z gnojnim izcedekom;
  • kronično vnetje srednjega ušesa (otitis media);
  • gnojno vnetje čelnih in maksilarnih sinusov;
  • vnetje kostnega mozga (osteomielitis);
  • parodontalna bolezen;
  • blokada solznega kanala;
  • vnetje šarenice očesa;
  • posteljice;
  • zapletov po operaciji oči.

Kontraindikacije za uporabo tripsina so:

  1. Alergijska reakcija na tripsin.
  2. Povečana zračnost pljuč ali emfizem.
  3. Odpoved srca.
  4. Distrofične in vnetne spremembe v jetrih.
  5. Tuberkuloza.
  6. Bolezni ledvic.
  7. Reaktivni pankreatitis.
  8. Motnje v sistemu koagulacije in antikoagulacije.
  9. Vnetni procesi v ledvicah (nefritis).
  10. Hemoragična diateza.

Kakšni neželeni učinki so lahko po uporabi tripsina?

  • alergija;
  • kardiopalmus;
  • pordelost in bolečina po intramuskularni injekciji;
  • hipertermija.

Poleg tega se lahko v bolnikovem glasu pojavi hripavost..

Navodila za uporabo zdravila

Kadar se lokalno uporabljajo za zdravljenje suhih ran ali ran z odmrlim tkivom, se uporabljajo obkladki, namočeni v tripsin..

Če želite to narediti, morate 50 mg encimskega pripravka raztopiti v 50 mg fiziološke raztopine (natrijev klorid ali 0,9% fiziološka raztopina).

Običajno uporabite posebej oblikovane triplastne robčke.

Po nanašanju obkladek ga pritrdimo s povojem in pustimo štiriindvajset ur..

Intramuskularno dajanje. 5 mg tripsina se razredči v 1-2 ml fiziološke raztopine, lidokaina ali novokaina. Odraslim se injicirajo dvakrat na dan, otrokom le enkrat..

Intrapleuralna uporaba. Po uvedbi zdravila ne morete dolgo ostati v enem položaju, ker otežuje redčenje izločka. Običajno po dveh dneh ta skrivnost pride ven skozi odtok..

Uporaba pri vdihavanju. Vdihavanje tripsina se izvaja z inhalatorjem ali bronhoskopom. Po postopku je bolje izpirati nos ali usta s toplo vodo (odvisno od načina izvedbe postopka).

V obliki kapljic za oči. Kapati jih je treba vsakih 6-8 ur 3 dni..

Značilnosti uporabe tripsina:

  1. Trippsin je prepovedano nanašati na krvaveče rane.
  2. Ni mogoče uporabiti za zdravljenje raka, zlasti na območjih razjede tkiva.
  3. Ni mogoče dajati intravensko.
  4. Pri zdravljenju majhnih otrok se pripravi individualna shema.
  5. Nosečnice ali doječe ženske naj to zdravilo jemljejo le, če je tveganje za njegovo smrt ali smrt ploda zelo veliko.

Farmakokinetika, tj. porazdelitev zdravila v telesu še ni raziskana. Znano je le, da se ob vstopu psa v telo tripsin veže na alfa-makroglobuline in alfa-1-antitripsin (njegov zaviralec).

Mnenja drog

Trenutno o pripravkih, ki vsebujejo tripsin, obstaja ogromno pozitivnih pregledov. Spekter njegove uporabe je v oftalmologiji še posebej širok. S pomočjo tega se zdravijo krvavitve, adhezije, vnetni in distrofični procesi šarenice, ker lahko te patologije, če ni ustrezne terapije, privedejo do nepopravljive slepote. Pri zdravljenju je zelo učinkovito kombinirati encimske pripravke z antialergičnimi zdravili, antibiotiki, hormoni, zdravili za glavkom, kar znatno poveča hitrost regeneracije tkiva.

Tripsin je mnogim pomagal ublažiti potek sklepnih bolezni, kot so artritis, poliartritis, artroza in revmatične lezije. Lajša bolečine, duši vnetje, obnavlja celoten obseg gibanja.

V primeru obsežnih poškodb, globokih ureznin, opeklin, encim omogoča vsaj olajšanje splošnega počutja žrtve in v prihodnosti pospešitev celjenja.

Povprečna cena zdravil s tripsinom v Rusiji se giblje od 500 rubljev.

Trippsin v analizah

V krvi se določi tako imenovani "imunoreaktivni" tripsin skupaj s snovjo, ki zavira njegovo aktivnost - alfa-1-antitripsin. Norma tripsina je 1-4 µmol / ml.min. Njeno povečanje lahko opazimo pri akutnem vnetju trebušne slinavke, onkoloških procesih v njej, pri cistični fibrozi, kronični odpovedi ledvic, spremlja pa lahko tudi potek virusnih bolezni. Zmanjšanje količine encima lahko kaže na diabetes mellitus tipa 1 ali na zgoraj navedene bolezni, vendar v kroničnih oblikah in v poznejših fazah.

Poleg krvnega testa se bolnikom pogosto predpiše koprogram. 3 dni pred tem testom ni priporočljivo jemati nobenih antibiotikov. Pri dekodiranju tripsina v blatu morda ne bomo zaznali. To je pogosto znak cističnih fibrotičnih procesov v trebušni slinavki. Močno zmanjšanje le-te opazimo pri cistični fibrozi, vendar to nikakor ne pomeni, da je diagnoza potrjena, za razjasnitev pa so potrebne dodatne raziskave. Trenutno verjamejo, da določitev aktivnosti tripsina v blatu ne kaže praktično nič..

Kratke informacije o tripsinu in drugih encimih so na voljo v videoposnetku v tem članku..

Cistična fibroza: definicija, diagnostični kriteriji, terapija. Nacionalno soglasje

Založnik

2. Diagnoza cistične fibroze

Pravočasna diagnoza cistične fibroze, ki v večini primerov omogoča zgodnji začetek terapije, tudi v predklinični fazi, izboljša prognozo bolezni, poveča učinkovitost zdravljenja in prepreči razvoj hudih zapletov, znatno zamudo v telesnem razvoju in v nekaterih primerih nepovratnih sprememb v pljučih. Zgodnja diagnoza omogoča družini pravočasno reševanje potrebnih vprašanj, povezanih z rojstvom zdravega otroka (genetsko svetovanje, prenatalna diagnoza CF v naslednjih nosečnostih) [1].

Diagnostika CF vključuje:

I) diagnostika s pregledom novorojenčkov (pred kliničnimi manifestacijami ali ob nastanku) [2];

II) diagnostika ob prisotnosti kliničnih manifestacij [1]:

• bolniki iz različnih rizičnih skupin z značilnimi kliničnimi manifestacijami (tabela 2-4), ki niso bili vključeni v presejalni program za novorojenčkov na CF;

• bolniki z lažno negativnimi rezultati presejalcev pri novorojenčkih s kliničnimi manifestacijami bolezni;

• bolniki z novorojenčno hipertripsinogenemijo, ki niso prejeli znojnega testa;

III) diagnostika med svojci bolnikov;

Iv) prenatalna diagnoza;

V) predimplantacijsko diagnozo.

Diagnostična merila za CF

Za reševanje težav z diagnozo CF, vključno z njenimi netipičnimi oblikami, so bila razvita merila, po katerih je za CF obvezen prisotnost značilnega kliničnega sindroma in dokazilo o vsaki disfunkciji klorovega kanala [3].

Upoštevajoč vse znanstvene dosežke v razumevanju narave cistične fibroze in bolezni, odvisnih od CF, v zadnjih 10 letih [4, 5], je skupina strokovnjakov iz Evropskega združenja za cistično fibrozo pod vodstvom Carla Castellanija pripravila nove diagnostične standarde, ki jih je uredil Alan R Smyth in Scott Bell (https://www.ecfs.eu/ecfs-standards-care/introduction) (slika 1).

Shema 1. Diagnostična merila za cistično fibrozo ECFS, 2013 [6]

Znojni test pozitiven

dve patogeni mutaciji gena CFTR v trans 6, ki povzročata CF (v skladu s bazo CFTR-2, http://www.cftr2.org)

od rojstva ali kasneje značilnih kliničnih znakov, vključno z (vendar ne omejeno na), kot so difuzna bronhiektazija, kultura sputuma patogene mikroflore, ki je pomembna za CF (zlasti Pseudomonas aeruginosa), zunanjo insuficienco trebušne slinavke, sindrom izgube soli, obstruktivno azoospermijo (moški)

I. Neonatalni presejalni pregledi

V juniju 2006 so v številnih regijah Ruske federacije in od januarja 2007 v vseh sestavnih subjektih Ruske federacije v okviru nacionalnega prednostnega projekta "Zdravje" izvedli množični pregled novorojenčkov za pet dednih bolezni, vključno s cistično fibrozo..

Večina obstoječih presejalnih shem temelji na določitvi ravni imunoreaktivnega triptozinogena (IRT) v krvi novorojenčkov v prvem tednu življenja, kar je zelo občutljiv (90-95%), vendar nespecifičen znak. Pri populaciji najdemo novorojenčkov hipertripsinogenemijo pri 5-10 otrok od 1000 zdravih novorojenčkov. Povišanje nivoja imunoreaktivnega tripsinogena v CF se pojavi kot posledica zamašitve kanalov trebušne slinavke z viskoznim izločkom, kar preprečuje prodiranje tripsinagen v lumen tankega črevesa, kjer se običajno spremeni v tripsin. To vodi v sproščanje tripsinagena v kri [7].

Protokol presejanja v Ruski federaciji vključuje 3 obvezne stopnje: IRT, ponovno testiranje IRT (občutljivost več kot 96%, specifičnost - ne manj kot 99,8%) [8], znojni test (shema 2). Na prvi stopnji se določi raven IRT v krvi novorojenčkov (4-5. Dan - pri polnoročnem, 7-8. Dan - pri nedonošenčkih). Odvzem vzorcev krvi se izvaja v skladu z odredbo Ministrstva za zdravje in socialni razvoj z dne 22. marca 2006 št. 185 "O množičnem pregledu novorojenih otrok za dedne bolezni." Vse zahteve za prejem, shranjevanje in pošiljanje vzorcev krvi je treba dosledno upoštevati. V vzorcih krvi je IRT nestabilen, zato ga ni priporočljivo hraniti in prevažati več kot 14 dni. Kontaminacija suhih krvnih madežev z iztrebkom novorojenčka, kar vodi do lažno pozitivnih rezultatov, je nesprejemljivo [9]. Če je mejna raven IRT presežena, se 21. do 28. dan življenja opravi ponovni preizkus. Vrednotenje IRT je dovoljeno v vzorcih, odvzetih najpozneje 8 tednov življenja, saj se lahko njegova aktivnost zmanjša in diagnostična vrednost študije izgubi [10, 11]. V primeru lažno pozitivnih rezultatov do konca prvega meseca se praviloma znižajo začetno zvišane vrednosti v nasprotju s kazalniki otrok s cistično fibrozo. Vendar so možne izjeme [12]. Če iz nekega razloga vzamemo prvi vzorec krvi za določanje RTI po 21 dneh, vendar pred 8 tedni, se kot prag vzame vrednost ponovnega testiranja (40 ng / ml). Če se po 8 tednih odvzame vzorec krvi in ​​je stalni prag čez prag, je treba otroka napotiti v center za cistično fibrozo. V primeru običajnega RTI, ki se vzame po 8 tednih, tega rezultata ni mogoče upoštevati, da bi otroka izključili iz skupine tveganj. V tem primeru je treba navesti, da preiskave novorojenčkov na cistično fibrozo niso opravili [13]. Takšen otrok mora imeti na zahtevo staršev preizkus znoj..

Shema 2. Algoritem neonatalnega presejalnega testiranja na CF v Ruski federaciji

Znojni test je zanesljiva metoda za diagnozo CF pri skoraj 98% bolnikov [14]. Gibson-Cookjeva določitev kloridov znoja še vedno velja za "zlati standard" [15]. V številnih središčih se določanje prevodnosti znoja uporablja kot test znojnosti z uporabo sistema za zbiranje in analizo znoja Macroduct v kombinaciji s analizatorjem znoja-Chek, in sistemom Vescor Nanoduct (ZDA), ki je bil razvit posebej za pregled novorojenčkov. Določanje koncentracije klorida je mogoče iz znoja, zbranega s sistemom za zbiranje in analizo znoja Macroduct. Številne tuje študije, dolgoročne ruske izkušnje, kažejo dobro povezavo med določanjem prevodnosti in koncentracijo kloridov [16, 17, 18, 19, 20]. V praksi je kombinirana uporaba tehnik optimalna. V vseh dvomljivih primerih, ko dobimo ponavljajoče se mejne rezultate prevodnosti znoja, je treba v laboratoriju izvesti kvantitativni Gibson-Cookov test z dovolj izkušnjami v tovrstnih študijah [6]. Če metoda za določanje kloridov znoja ni na voljo, je treba poleg večkratnih meritev prevodnosti znoja opraviti celoten pregled bolnika, vključno z diagnostiko DNK, fekalno elastazo itd., bikarbonat, amonij itd.) in dobljeni rezultat presega resnično koncentracijo kloridov [16, 17].

Preskus znoj se lahko opravi na otroku, starem 48 ur, in tehta vsaj 2 kg [21–23]. Nedonošenčki se ponavadi znojijo z nižjo hitrostjo kot dojenčki. Čas odvzema znoja ne sme presegati 30 minut, najmanjša dovoljena količina znoja je 75 mg (15 μl v zbiralniku Macroduct), hitrost znojenja mora biti najmanj 1 g / m2 / min [9]. Obvezno je temeljito predhodno čiščenje pacientove kože, vključno s umivanjem z milom in nadaljnjim zdravljenjem z alkoholom brez dodajanja klora. Pred preskušanjem ne nanašajte losjonov in olj na kožo. Posebno pozornost je treba nameniti pripravi kože pri bolnikih, ki so dalj časa v bolnišnici..

Priporočljivo je, da kot normalne kazalnike upoštevamo raven klorida (Gibson-Cookov test), ki ne presega 60 mmol / l, prevodnost znoja> 80 mmol / l (tabela 1) [9, 5, 17, 18, 23].

Tabela 1. Razlaga rezultatov preskusov znojenja

Rezultati preskusov znojnic

Možni vzroki rezultatov mejnih preskusov znojenja:

1. Posamezne značilnosti pri ljudeh brez cistične fibroze, zlasti pri odraslih.

2. Nepravilna priprava na vzorec.

3. Prenašanje "mehkih" mutacij pri cistični fibrozi.

Tako imajo bolniki z mejnimi rezultati testov znojenja (kloridi 30-59 mmol / L in / ali prevodnost 50-79 mmol / L) resnične težave pri diagnozi..

• uporaba več metod za določanje kloridov znojnic; ponavljajoče se študije;

• napredna analiza DNK (zaporedje genov);

• podaljšani klinični, laboratorijski in instrumentalni pregled: skatologija (vključno z določanjem fekalne elastaze), elektroliti v biokemijski analizi krvi, kultura sputuma / razmaz iz zadnje stene žrela, rentgen prsnega koša, sinusi, spermogram;

• opazovanje v centru za cistično fibrozo do dokončne odločitve o diagnozi. Bolniki niso izbrisani iz registra, dokler diagnoza ni izključena;

• v številnih evropskih centrih za potrditev okvare transporta ionov se uporablja metoda določanja razlike v nosnih potencialih ali merjenje električnega toka v črevesni biopsiji [23, 24, 25], ki odraža disfunkcijo klorovega kanala. Obe metodi temeljita na električni naravi transporta ionov in sta zelo informativni za diagnozo CF.

Trenutno se te metode v Ruski federaciji ne uporabljajo..

Lažno pozitivni in lažno negativni rezultati testov znojenja

Pri izvajanju testa znojnice je mogoče dobiti lažno pozitivne (do 15%) in lažno negativne (do 12%) rezultate. To je lahko posledica tehničnih napak in fizioloških značilnosti pacienta [26].

Znojni test lahko daje lažno negativne rezultate pri otrocih s CF, ob prisotnosti edema brez beljakovin, po odpravi katerega test postane pozitiven. Ne smemo pozabiti na možnost pridobitve negativnega rezultata testa znoj pri bolnikih s CF, zlasti pri homo- ali heteroroznih nosilcih nekaterih mutacij CFTR, pri katerih je delovanje kanala klora delno ohranjeno (na primer 3849 + 10 kb C> T, E92K) [27-29].

Po drugi strani je lažno pozitiven test mogoče dobiti pri bolnikih z različnimi stanji. Vendar ima večina teh stanj zelo značilno klinično sliko in njihova pogostost pri populaciji je nizka [30].

V tabeli 2 so navedeni pogoji, ki jih včasih spremlja povečanje klorida znojnic. Ne pozabite, da so te situacije izjemno redke, pozitiven test znojenja pa je zelo specifičen test za diagnozo CF..

Tabela 2. Drugi pogoji, pri katerih je lahko znojni test pozitiven in mejen

• Sindrom pridobljene imunske pomanjkljivosti (AIDS)